Štandardizovaná manipulácia, fixácia a preprava vzoriek biopsie prsníka

https://www.mayoclinic.org/tests-procedures/prsia-biopsia/about/pac-20384812

Vysoká-kvalitabiopsia prsníkazávisí nielen od presnosti rádiológa, ale rovnako aj od štandardizovaného zaobchádzania so vzorkou patológom. Každý krok od extrakcie tkaniva po prípravu sklíčka môže ovplyvniť konečnú diagnózu. Tento článok sleduje cestu vzorky a podrobne popisuje, ako zabezpečiť, aby každá vzorka poskytovala presné diagnostické informácie.

1. Vyzdvihnutie vzorky a počiatočná kontrola

Po vystrelení lekár otvorí zárez na ihle, aby získal vzácnu vzorku-malé, zvyčajne sivasté-biele alebo žltkasté tkanivo podobné vláknu-.

• Hrubá skúška:Najprv posúďte integritu. Ideálne jadrá CNB sú valcové, 1–1,5 cm dlhé, s priemerom ~1–2 mm. Fragmentované, drsné vzorky môžu naznačovať zlé zacielenie (napr. centrum kalcifikácie) alebo technické problémy.
• Kontrola množstva:Zaznamenajte počet získaných jadier. Na podporu rutinnej histológie, imunohistochémie a potenciálneho molekulárneho testovania sú potrebné minimálne 3–4 jadrá.

2. Rýchla a primeraná fixácia: prvoradá dôležitosť

Fixácia je prvým a najdôležitejším chemickým krokom pri spracovaní vzorky. Rýchlo zabíja bunky, koaguluje proteíny, zabraňuje autolýze/hnitiu a optimálne zachováva mikroarchitektúru.

• Voľba fixačného prostriedku:​ 10 % neutrálny pufrovaný formalín (NBF)je absolútny štandard. Výborná penetrácia, rovnomerná fixácia, dobré jadrové/cytoplazmatické farbenie.Nikdypoužívajte alkohol, glutaraldehyd alebo iné neštandardné{0}}roztoky.
• Načasovanie:Vzorky musia byť umiestnené vo fixačnom prostriedkuokamžitepri extrakcii. Oneskorená fixácia spôsobuje degradáciu DNA, čo ohrozuje IHC a molekulárne výsledky.
• Objemový pomer:Fixačný objem musí byť4-10 krátobjem vzorky. Kritické pre malé jadrá. Nedostatočný fixatív vyčerpáva tlmivú kapacitu, znižuje pH, okysľuje tkanivo a ničí antigenicitu.
• Trvanie:Ideálna fixácia:6-48 hodín. Pod-fixáciou (<6h) causes soft, difficult-to-section tissue. Over-fixation (>72h) riskuje „maskovanie antigénu“, čo zhoršuje farbenie IHC.

3. Štandardizovaný prepravný protokol

• Nádoba:​ Netesné-bezpečne utesnené nádoby na vzorky.
• Označenie:Štítky musia obsahovať meno pacienta, ID, miesto biopsie (ľavý/pravý prsník, kvadrant), typ vzorky (CNB/VAB), dátum a objednávajúceho lekára. Nejednoznačné označenie je hlavnou príčinou zámeny vzoriek-.
• Formulár žiadosti:Primárny zdroj klinických informácií patológa. Povinné podrobnosti: Klinické nálezy, Popis zobrazenia (kategória BI-RADS), Predchádzajúca anamnéza/operácia prsníka, Hormonálna terapia a Stručná poznámka k postupu.

Doprava:Nádoby zaistite vo vyhradených nosičoch, aby ste zabránili rozliatiu. Počas prepravy sa vyhnite silnému traseniu, aby ste zachovali krehkú štruktúru tkaniva.

4. V-Laboratórnom spracovaní

• Potvrdenie a overenie:​ Pracovníci patológie znova-overia štítok so vzorkou podľa podrobností požiadavky.
• Dehydratácia a čistenie:​ Automatizované tkanivové procesory spracovávajú vzorky cez triedené alkoholy (dehydratácia), xylén (čistenie) a roztavený parafínový vosk (~12–16 hodín).
• Vkladanie:Infiltrované tkanivo je orientované v roztavenom vosku vo forme, ochladené na vytvorenie parafínového bloku.Kritické pre jadrá:Orientujte pásik tkanivakolmý​ na tvár bloku, aby sa maximalizovalo{0}}zobrazenie priečnych rezov na snímkach.
• Delenie a farbenie:Mikrotóm odreže 4–5 μm rezy z bloku, pripevní ich na podložné sklíčka, zafarbí hematoxylínom a eozínom (H&E) a krycie sklíčka. Patológovia skúmajú pod svetelnou mikroskopiou.

5. Zvláštne okolnosti

• Podozrenie na lymfóm:Rezervujte si čerstvé tkanivo alebo použite špecializované fixačné prostriedky (napr. RNAneskôr) na prietokovú cytometriu/genetické štúdie.
• ER/PR testovanie:Vysoká citlivosť na čas / teplotu fixácie; prísne dodržiavanie protokolov je povinné.
• HER2 testovanie:​ Ak je IHC 2+, vyžaduje sa potvrdenie FISH; vyžaduje najvyššie štandardy kvality fixácie.

záver:Presná patologická správa začína biopsiou, závisí od fixácie a vyvrcholí v expertnej mikroskopii. Úzka spolupráca medzi klinickými lekármi a patológmi spolu s dôslednou štandardizáciou celej pred-analytickej fázy tvorí základ presnej diagnostiky ochorenia prsníka.